氨甲酰磷酸合成酶

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氨甲酰磷酸合成酶大亚基中的ATP结合域
PDB 1dv2 EBI.jpg
生物素羧化酶结构,突变体e288k,与ATP结合
鉴定
标志 CPSase_L_D2
Pfam(蛋白家族查询站) PF02786
Pfam宗系 CL0179
InterPro(蛋白数据整合站) IPR005479
PROSITE(蛋白数据站) PDOC00676
SCOP(蛋白结构分类数据站) 1bnc
氨甲酰磷酸合成酶大亚基中低聚域
PDB 1bxr EBI.jpg
氨甲酰磷酸合成酶结构,与ATP类似物AMP-PNP结合在一起
鉴定
标志 CPSase_L_D3
Pfam(蛋白家族查询站) PF02787
InterPro(蛋白数据整合站) IPR005480
PROSITE(蛋白数据站) PDOC00676
SCOP(蛋白结构分类数据站) 1bnc
氨甲酰磷酸合成酶结构N-末端域
PDB 1ulz EBI.jpg
丙酮酸羧化酶的生物素羧化酶亚基晶体结构
鉴定
标志 CPSase_L_chain
Pfam(蛋白家族查询站) PF00289
InterPro(蛋白数据整合站) IPR005481
PROSITE(蛋白数据站) PDOC00676
SCOP(蛋白结构分类数据站) 1bnc
氨甲酰磷酸合成酶小亚基N-末端域
PDB 1kee EBI.jpg
由抗生素阿西维辛所致的氨甲酰磷酸合成酶酰胺转移酶活性的失活
鉴定
标志 CPSase_sm_chain
Pfam(蛋白家族查询站) PF00988
InterPro(蛋白数据整合站) IPR002474
PROSITE(蛋白数据站) PDOC00676
SCOP(蛋白结构分类数据站) 1jdb

氨甲酰磷酸合成酶英语Carbamoyl phosphate synthetase)是催化自穀氨醯胺EC 6.3.5.5)或氨(EC 6.3.4.16)与碳酸氢盐合成氨甲酰磷酸这一反应的一种ATP依赖性酶[1]。此酶催化ATP碳酸氢盐产生了氨甲酰磷酸与ADP。羰基磷酸盐先与反应产生氨基甲酸盐。接下来,氨基甲酸盐与第二分子的ATP反应生成氨甲酰磷酸ADP

原核生物与真核生物中,氨甲酰磷酸合成酶催化了嘧啶精氨酸生物合成以及大多数陆栖脊椎动物尿素循环中的首个关键步骤[2]。大多数原核生物都只有一种类型氨甲酰磷酸合成酶,后者同时用于精氨酸与嘧啶的生物合成,然而某些细菌有着分别不同的类型。

此酶有三种不同型,供应各不相同的功能。

机理[编辑]

氨甲酰磷酸合成酶的机制由三个不同步骤组成,并且都是不可逆反应[4]

  1. 碳酸氢盐被ATP磷酸化,产生出羰基磷酸盐。
  2. 羰基磷酸盐接下来与氨反应生成氨基甲酸盐,并释放一份子无机磷酸。
  3. 第二个ATP分子接下来磷酸化氨基甲酸盐,即生成氨甲酰磷酸。

目前已知,此酶的活性可被三羟甲基氨基甲烷羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液致使失活[5]

结构[编辑]

氨甲酰磷酸合成酶(CPSase)是一个异二聚,由一大一小两个亚基组成(CPSase Ⅲ则是个例外,其由单个多肽链组成,这有可能起因于谷氨酰胺酶与合成酶两者之间的基因融合[3][6][2]。氨甲酰磷酸合成酶具有三个活性位点,其中一个位于小亚基,另外两个位于大亚基。小亚基包含有穀氨醯胺结合位点催化谷氨酰胺水解谷氨酸,后者被转移到大上被用于合成氨甲酰磷酸。小亚基具有一个3-层次的β/β/α结构,这一结构在一般蛋白质中被普遍认为是一个可活动单元,可以转移氨。氨甲酰磷酸合成酶小亚基的C-末端域具有谷氨酰胺氨基转移酶活性。大亚基具有两个同源的羧基磷酸盐域,两个都具有ATP结合位点;然而,N-末端羧基磷酸盐催化碳酸氢盐的磷酸化,然而C-末端域主催化氨基甲酸盐中间体的磷酸化[7]。氨甲酰磷酸合成酶大亚基中有重复的羧基磷酸盐域,这一域在生物素依赖性的乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、丙酰辅酶A羧化酶(PCCase)、丙酮酸羧化酶(PC)与尿素羧化酶之中亦有单拷贝。

细菌氨甲酰磷酸合成酶之中的大亚基具有四个二级结构域:羧基磷酸盐域1、低聚域、氨甲酰磷酸域2以及变构域[8]大腸桿菌的氨甲酰磷酸合成酶异质二聚体含有两个分子通道:一个氨通道以及一个氨基甲酸盐通道。这些域间隧道将三个不同的活性位点相互连接起来,并作为不稳定的反应中间体(氨和氨基甲酸盐)在相关的活性位点之间传递的通道[9]。氨甲酰磷酸合成酶的催化机制涉及到氨基甲酸盐自位于大亚基的N-末端域的合成位点扩散穿过酶的内部继而到达位于C-末端域的磷酸化位点。

参考文献[编辑]

  1. ^ Simmer JP, Kelly RE, Scully JL, Evans DR, Rinker Jr AG. Mammalian carbamyl phosphate synthetase (CPS). DNA sequence and evolution of the CPS domain of the Syrian hamster multifunctional protein CAD. J. Biol. Chem. 1990, 265 (18): 10395–10402. PMID 1972379. 
  2. ^ 2.0 2.1 Holden HM, Thoden JB, Raushel FM. Carbamoyl phosphate synthetase: an amazing biochemical odyssey from substrate to product. Cell. Mol. Life Sci. 1999-10, 56 (5–6): 507–22. doi:10.1007/s000180050448. PMID 11212301. 
  3. ^ 3.0 3.1 Saha N, Datta S, Kharbuli ZY, Biswas K, Bhattacharjee A. Air-breathing catfish, Clarias batrachus upregulates glutamine synthetase and carbamyl phosphate synthetase III during exposure to high external ammonia. Comp. Biochem. Physiol. B, Biochem. Mol. Biol. 2007-07, 147 (3): 520–30. doi:10.1016/j.cbpb.2007.03.007. PMID 17451989. 
  4. ^ Biochemistry, 3rd edition, J.M. Berg, J.L. Tymoczko, L. Stryer
  5. ^ Lund, P.; Wiggins, D. Inhibition of carbamoyl-phosphate synthase (ammonia) by Tris and Hepes. Effect on Ka for N-acetylglutamate. Biochem. J. 1987, 243 (1): 273–276. PMC 1147843. PMID 3606575. 
  6. ^ Raushel FM, Thoden JB, Holden HM. The amidotransferase family of enzymes: molecular machines for the production and delivery of ammonia. Biochemistry. 1999-06, 38 (25): 7891–9. doi:10.1021/bi990871p. PMID 10387030. 
  7. ^ Stapleton MA, Javid-Majd F, Harmon MF, Hanks BA, Grahmann JL, Mullins LS, Raushel FM. Role of conserved residues within the carboxy phosphate domain of carbamoyl phosphate synthetase. Biochemistry. 1996-11, 35 (45): 14352–61. doi:10.1021/bi961183y. PMID 8916922. 
  8. ^ Thoden JB, Raushel FM, Benning MM, Rayment I, Holden HM. The structure of carbamoyl phosphate synthetase determined to 2.1 A resolution. Acta Crystallogr. D Biol. Crystallogr. 1999-01, 55 (Pt 1): 8–24. doi:10.1107/S0907444998006234. PMID 10089390. 
  9. ^ Kim J, Howell S, Huang X, Raushel FM. Structural defects within the carbamate tunnel of carbamoyl phosphate synthetase. Biochemistry. 2002-10, 41 (42): 12575–81. doi:10.1021/bi020421o. PMID 12379099. 

外部链接[编辑]

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