熱啟動聚合酶鏈式反應

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熱啟動聚合酶鏈式反應(英語:Hot start PCR)是一種改良的聚合酶鏈式反應方法,主要用來避免操作過程中產生非特異性序列的擴增。將DNA聚合酶與其他反應物隔絕,或是使用在高熱狀況下才會活化的聚合酶,避免在未達到設定溫度前就開始反應。

熱啟動PCR有幾種方式:

  • 蠟隔絕法:將除了聚合酶以外的反應物加入PCR管後,加滴熔融的石蠟;待石蠟凝固後再加入聚合酶。放入PCR儀開始反應升溫後,石蠟融化浮至最頂層,聚合酶才與其他反應物混合。石蠟可同時作為防止蒸發用。
  • 熱啟動聚合酶(化學型):經過化學分子修飾的聚合酶,高熱下結構改變而啟動。
  • 熱啟動聚合酶(抗體):帶有針對聚合酶的免疫抗體,高熱下使抗體分離而啟動。
  • 熱啟動聚合酶(共價鍵結):改良自抗體型,使用小分子的化合物,阻塞聚合酶作用位置,高溫下分離。