马克萨姆-吉尔伯特测序

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马克萨姆-吉尔伯特测序英语Maxam-Gilbert sequencing)是一项由阿伦·马克萨姆沃尔特·吉尔伯特于1976~1977年间开发的DNA测序方法。此项方法基于:对核鹼基特异性地进行局部化学改性,接下来在改性核苷酸毗邻的位点处DNA骨架发生断裂[1]

马克萨姆-吉尔伯特测序的举例,切断相同的被标记DNA片段的不同位点将会得到不同大小的被标记片段。这些片段接下来可被凝胶电泳分离开来。

马克萨姆-吉尔伯特测序与桑格双脱氧法一起是首批被广泛采用的DNA测序方法,代表了第一代DNA测序方法。马克萨姆-吉尔伯特测序不再广泛使用,而被下一代测序方法取而代之。

历史[编辑]

尽管弗雷德里克·桑格与阿兰·科尔森发表他们的加减测序法两年后,马克萨姆与吉尔伯特才发表他们的化学测序法[2][3]。然而最初的桑格法须要在每次读序之前克隆得到单链DNA产物,因此马克萨姆-吉尔伯特测序法迅速得到了推广,因为被纯化的DNA可被直接使用。然而,随着链终止法的改良(见下),马克萨姆-吉尔伯特测序逐渐失宠,这是由于其:技术复杂性阻碍其成为标准分子生物学套装使用、大量使用危险药品以及难于扩大规模[4]

参考文献[编辑]

  1. ^ Maxam AM, Gilbert W. A new method for sequencing DNA. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1977.February, 74 (2): 560–4. Bibcode:1977PNAS...74..560M. doi:10.1073/pnas.74.2.560. PMC 392330. PMID 265521. 
  2. ^ Sanger F, Coulson AR. A rapid method for determining sequences in DNA by primed synthesis with DNA polymerase. J. Mol. Biol. 1975.May, 94 (3): 441–8. doi:10.1016/0022-2836(75)90213-2. PMID 1100841. 
  3. ^ Sanger F. Determination of nucleotide sequences in DNA. Nobel lecture, 8 December 1980.
  4. ^ Graziano Pesole; Cecilia Saccone. Handbook of comparative genomics: principles and methodology. New York: Wiley-Liss. 2003: 133. ISBN 0-471-39128-X.