LB培养基

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一瓶LB液體培養基和一塊含有瓊脂的LB固體培養平板

LB培养基Lysogeny broth,LB),是微生物學實驗中最常用的營養性培養基,用於培養大腸桿菌細菌,分為液態培养基和加入瓊脂製成的固態培養基。加入抗生素的 LB 培養基可用於篩選以大腸杆菌爲宿主的克隆

名稱[编辑]

儘管該培養基的名稱被廣泛解釋爲Luria-Bertani 培養基,然而根據其發明人貝爾塔尼英语Giuseppe Bertani(Giuseppe Bertani)的說法,這個名字來源於英語的 lysogeny broth,即溶菌肉湯[1]

配方[编辑]

LB 培養基的配方發表於1951年有關溶源性英语lysogeny的論文中。用於使志賀氏菌屬的細菌增長[1][2]

LB培養基在1950年代曾被用作培養大腸桿菌的業界標準配方[3][4][5][6][7]。它還被廣泛應用於分子微生物學以及質體DNA的製備上,是重組大腸桿菌DNA時最常用的培養基[8]。但LB培養基不鼓勵應用於生理學研究上[9]


每個LB培養基的配方不盡相同,但大概都會包含下列幾項:

一升水中加入:

1951年的原始論文中,貝爾塔尼在1公升的水中加入了10克的氯化鈉、1克的葡萄糖[6],但之後便剔除掉了葡萄糖。


氯化鈉的量經常隨細菌的生長需求不同而有所改變,向鹽分較低的Lennox和Luria培養基就適用於對於鹽分較敏感的抗生素實驗上[10]

  • LB-Miller (10 g/L NaCl)
  • LB-Lennox (5 g/L NaCl)
  • LB-Luria (0.5 g/L NaCl)

製備方法[编辑]

LB液體培養基

至1L并調pH值至7.0後高溫滅菌。如需要製成固態培養基,在調pH值後加入1.5%(质量体积比,即每升培养基中加入15克)的瓊脂再滅菌。

  • 將上述成分溶於800 ml的去離子水中。
  • 加入蒸餾水或去離子水至一公升。
  • 高壓釜以 121 °C 滅菌20分鐘。
  • 冷卻後即可使用

參見[编辑]

參考文獻[编辑]

  1. ^ 1.0 1.1 Bertani, G. Lysogeny at mid-twentieth century: P1, P2, and other experimental systems. Journal of bacteriology. 2004, 186 (3): 595–600. doi:10.1128/JB.186.3.595-600.2004. PMC 321500. PMID 14729683.  编辑
  2. ^ Bertani, G. (1951). Studies on lysogenesis. I. The mode of phage liberation by lysogenic Escherichia coli. J. Bacteriol. 62:293-300. PMID 14888646 PDF
  3. ^ Miller, J. H. (1972). Experiments in molecular genetics. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York.
  4. ^ Luria, S. E., J. N. Adams, and R. C. Ting. (1960). Transduction of lactose-utilizing ability among strain of E. coli and S. dysenteriae and the properties of the transducing phage particles. Virology. 12:348-390. PMID 13764402
  5. ^ Lennox, E. S. (1955). Transduction of linked genetic characters of the host by bacteriophage P1. Virology. 1:190-206. PMID 13267987
  6. ^ 6.0 6.1 Luria, S. E., and J. W. Burrous. (1957). Hybridization between Escherichia coli and Shigella. J. Bacteriol. 74:461-476. PMID 13475269 PDF
  7. ^ Anderson, E. H. (1946). Growth requirement of virus-resistant mutants of Escherichia coli strain B. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 32:120-128. PMID 16588724
  8. ^ Sambrook, J., E. F. Fritsch, and T. Maniatis. (1989). Molecular cloning: a laboratory manual, 2nd edition. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York.
  9. ^ Nikaido, H. (2009). The Limitations of LB Medium. Small things considered - The Microbe Blog. ASM. http://schaechter.asmblog.org/schaechter/2009/11/the-limitations-of-lb-medium.html
  10. ^ Commonly used bacterial E.coli growth media. Expression Technologies Inc.  http://www.exptec.com/Reagents/Common%20Media.htm