DNA提取
DNA提取概述[编辑]
DNA提取分为三个基本步骤，每个步骤的具体方法可根据样品种类、影响提取的物质以及后续步骤的不同而有区别。
- 利用研磨或者超声波破碎细胞得到沉淀，或者酚或氯仿抽提，以除掉细胞内的蛋白，如与DNA结合的组蛋白。
- 将DNA在冷乙醇或异丙醇中沉淀，因为DNA在醇中不可溶而黏在一起，这一步也能除掉盐分。
- 测定样品的DNA浓度并分析DNA纯度，使用二苯胺试剂进行定性鉴定。
DNA的检测[编辑]
二苯胺（DPA）指示剂能够证明DNA的存在。在酸中加热后，含有脱氧糖的DNA水解，2-脱氧核糖转变为ω-羟基菊芋糖醛（ω-hydroxylevulinyl aldehyde），与二苯胺反应，产生蓝色的化合物。DNA浓度可以利用分光光度计通过测量溶液在600nm的吸光度来计算。
测量DNA纯度的方法是测量DNA溶液在260和280nm的吸光度。DNA吸收260nm处的紫外光，而蛋白质吸收280nm处的。一个较纯的DNA样品应该基本不含蛋白质，因此260/280的吸光度比值应该较高。
DNA也可以通过限制性核酸内切酶切开后跑胶，与已知浓度的DNA分子量标准（marker或者ladder）对照来测定浓度。
DNA的使用[编辑]
提取得到的基因组DNA包含细胞核和线粒体DNA（真核生物）以及叶绿体DNA（植物和藻类）。这些DNA可用于法医学鉴定、诊断和系统发育研究，以及用于进一步的聚合酶链式反应（PCR）以获得DNA中的特殊信息。
纯化得到的DNA也可用于研究DNA结构和化学性质，检验DNA-蛋白质相互作用，进行南方墨点法杂交，复制和测序。