雙縮脲試劑

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雙縮脲試劑與多肽形成的配合物。

雙縮脲試劑是一個用於鑒定蛋白質分析化學試劑。它是一個鹼性的含銅試液,呈藍色,由1%氫氧化鉀、幾滴1%硫酸銅酒石酸鉀鈉配製。當底物中含有肽鍵時(多肽),試液中的銅與多肽配位,配合物呈紫色。可通過比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑒定反應的靈敏度為5-160mg/ml。

雙縮脲試劑中真正起作用的是硫酸銅,而氫氧化鉀僅僅是為了提供鹼性環境,因此它可被其他鹼,如氫氧化鈉所代替。向試劑中加入碘化鉀,可延長試劑的使用壽命。

使用方法:先將雙縮脲試劑A(氫氧化鉀溶液)加入組織樣液,振蕩均勻(必須營造鹼性環境),再加入雙縮脲試劑B(硫酸銅與酒石酸鉀鈉的混合溶液),振蕩均勻。如果組織里含有蛋白質,那麼會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與Cu2+絡合成紫紅色的絡合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。

參見[編輯]

參考資料[編輯]