16S 核糖体RNA

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嗜热栖热菌Thermus thermophilus)的30S亚基的三维分子结构图。分子中的淡蓝色部分为蛋白质,淡橙色部分为RNA单链。[1]

16S 核糖体RNA(16S ribosomal RNA),简称16S rRNA,是原核生物核糖体30S 亚基的组成部分。16S rRNA的长度约为1,542 nt卡尔·乌斯乔治·福克斯是率先在系统发育中使用的16S rRNA基因的两个先驱者[2]

一个细菌细胞中可包含多个具有不同序列的16S rRNA[3]

功能[编辑]

已知16S rRNA具有如下几项功能:

结构[编辑]

16S.svg

通用引物[编辑]

由于不同种的真细菌古细菌间的16S rRNA基因16S rDNA)是高度保守的[5],16S rDNA常被用于对各种生物进行的系统发生学方面的研究[6]这种运用16S rRNA对生物进行系统发生学研究的方法由卡尔·沃斯(Carl Woese)开创[7]。另外,线粒体叶绿体中的rRNA也都被扩增了。 在获得能提供系统发育学信息的16S rRNA分子时需要利用通用PCR引物对16S rRNA分子进行扩增。 16S rRNA序列的对比分析需要在这类“通用引物”的脱氧核糖核酸分子的辅助下完成,这类分子具有如下序列:

  • 8UA正向:5'-AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG-3'
  • 519B反向:5'-GTA TTA CCG CGG CKG CTG-3'
  • 反向:ACG GCT ACC TTG TTA CGA CTT

这类引物因并未在近期发现的几种属于纳古菌门Nanoarchaeota)的热液古菌[8]中分离识别出来,也被称为准通用引物

引物名字 序列 (5'-3') 参考资料
8F AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG [9][10]
U1492R GGT TAC CTT GTT ACG ACT T 同上
928F TAA AAC TYA AAK GAA TTG ACG GG [11]
336R ACT GCT GCS YCC CGT AGG AGT CT 同上
1100F YAA CGA GCG CAA CCC
1100R GGG TTG CGC TCG TTG
337F GAC TCC TAC GGG AGG CWG CAG
907R CCG TCA ATT CCT TTR AGT TT
785F GGA TTA GAT ACC CTG GTA
805R GAC TAC CAG GGT ATC TAA TC
533F GTG CCA GCM GCC GCG GTA A
518R GTA TTA CCG CGG CTG CTG G
27F AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG [12]
1492R CGG TTA CCT TGT TAC GAC TT 同上

PCR中的应用[编辑]

除了高度保守的引物结合位点之外,16S 核糖体RNA基因序列包含高变区,可以提供具体物种的签名序列用于鉴定细菌的有用的[13][14]。其结果是,16S 核糖体RNA基因测序已经成为医学微生物学普遍的作为一种快速和廉价的鉴定细菌表型方法的替代方法[15]。尽管它最初用于鉴定细菌,随后16S测序被发现能够重新分类细菌进入完全新的物种[16],或者甚至是属[17][18]。它还已经被用于描述具有从未被成功培养的新物种[19][20]

16S核糖体数据库[编辑]

因为它存在于大多数微生物并显示适当的变化,16S rRNA基因被用作分类鉴定微生物的标准。大多数细菌和古细菌的16S rRNA基因序列型菌株可在公共数据库得到,例如NCBI数据库。然而,在这些数据库中发现的序列的质量往往没有验证。因此,只收集16S rRNA序列辅助数据库被广泛使用。最经常使用的数据库如下:

1) EzTaxon-e. http://eztaxon-e.ezbiocloud.net/ [21]

2) 核糖体数据库项目。 http://rdp.cme.msu.edu/ 核糖体数据库项目(RDP)。

3) SILVA. [22]

4) Greengenes. Greengenes是基于新生系统发生,提供了标准的操作分类单元集的质量控制,全面的16S参考数据库和分类。该网站的官方主页是http://greengenes.secondgenome.com,并在Creative Commons许可BY-SA3.0许可[23][24]

参考文献[编辑]

  1. ^ Schluenzen F, Tocilj A, Zarivach R, Harms J, Gluehmann M, Janell D, Bashan A, Bartels H, Agmon I, Franceschi F, Yonath A 在3.3 Å解析度下具有功能活性的核糖体小亚基. Structure of functionally activated small ribosomal subunit at 3.3 angstroms resolution. Cell. 2000, 102 (5): 615–23. doi:10.1016/S0092-8674(00)00084-2. PMID 11007480. 
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外部链接[编辑]