293T

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293T(或HEK293T)是一種由HEK 293細胞系衍生的人類細胞系,表达SV40大T抗原英语SV40 large T antigen突變體。常用於生物蛋白的表達,以及重組逆轉錄病毒的製造。

来源[编辑]

293T细胞系最初在斯坦福大学Michele Calos的实验室中制造,是一种稳定转染了编码SV40大T抗原英语SV40 large T antigen温度敏感型突變體质粒的HEK 293细胞,最初被称为293/tsA1609neo。[1] 其在文献中第一次被称为“293T”,是在被用于开发生产逆转录病毒颗粒的BOSC23细胞系时。[2]

特点[编辑]

在制造293T细胞时转染的pRSV-1609质粒使得它具有新霉素/G418抗性,并且可以表达SV40大T抗原英语SV40 large T antigen的tsA1609突变体。这种突变的基因在33℃时具有完全的活性,在37℃时也具有相当的活性,但是在40℃时失活[3]。和它的原型293细胞一样,293T细胞在用DNA转染时效率很高。而且由于SV40大T抗原的表达,携带SV40复制原点的质粒可以在293T细胞中复制,并且在短时间内保持较高的拷贝数,使得其表达重组蛋白或病毒的量大大增加。

基因组[编辑]

对3个独立的293T分离株细胞系都已经进行了全基因组测序,它们彼此之间是相似的,不过和原来HEK 293细胞系的基因组都已经有可检测的差别[4]

參考文献[编辑]

  1. ^ DuBridge RB, Tang P, Hsia HC, Leong PM, Miller JH, Calos MP. Analysis of mutation in human cells by using an Epstein-Barr virus shuttle system. Mol. Cell. Biol. Jan 1987, 7 (1): 379–387. PMC 365079. PMID 3031469. doi:10.1128/MCB.7.1.379. 
  2. ^ Pear WS, Nolan GP, Scott ML, Baltimore D. Production of high-titer helper-free retroviruses by transient transfection. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 15 Sep 1993, 90 (18): 8392–8396. PMC 47362. PMID 7690960. doi:10.1073/pnas.90.18.8392. 
  3. ^ Rio, D. C.; Clark, S. G.; Tjian, R. A mammalian host-vector system that regulates expression and amplification of transfected genes by temperature induction. Science (New York, N.Y.). 1985-01-04, 227 (4682): 23–28. ISSN 0036-8075. PMID 2981116. doi:10.1126/science.2981116. 
  4. ^ Lin, Yao-Cheng; Boone, Morgane; Meuris, Leander; Lemmens, Irma; Van Roy, Nadine; Soete, Arne; Reumers, Joke; Moisse, Matthieu; Plaisance, Stéphane. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations. Nature Communications. 2014-09-03, 5: 4767 [2020-01-03]. ISSN 2041-1723. PMC 4166678. PMID 25182477. doi:10.1038/ncomms5767. (原始内容存档于2019-09-13). 

外部聯結[编辑]