RIPA裂解液
外观
RIPA裂解液(英語:Radioimmunoprecipitation assay buffer,全称放射免疫沉淀法缓冲液)是一种用于裂解细胞或组织的裂解缓冲液,常用于放射性免疫沉淀分析(RIPA)[1][2]。此缓冲液的变性性能比NP-40裂解液或曲拉通X-100裂解缓冲液更强,因为它包含离子型去垢剂SDS和脱氧胆酸钠作为破坏核膜,提取核内物质的活性成分。RIPA缓冲液在实验时能提供低的背景,但也会使激酶变性。
配方
[编辑]用于提取总蛋白质的RIPA缓冲液配方如下:
- 25mM Tris (也可以用10mM 磷酸缓冲液来代替)pH值为7-8
- 150mM 氯化钠
- 0.1% SDS(可选)
- 0.5%的 脱氧胆酸钠
- 1%的Triton X-100或 NP-40
- 蛋白酶抑制剂,例如苯甲基磺酰氟(PMSF)或其它蛋白酶抑制剂(根据试剂商提供的说明使用)。
参考文献
[编辑]- ^ Comparison of a radioimmunoprecipitation assay to immunoblotting and ELISA for detection of antibody to African swine fever virus. J. Vet. Diagn. Invest. July 1990, 2 (3): 191–6 [2017-05-25]. PMID 2094444. doi:10.1177/104063879000200307. (原始内容存档于2016-08-04).
- ^ Ngoka LC. Sample prep for proteomics of breast cancer: proteomics and gene ontology reveal dramatic differences in protein solubilization preferences of radioimmunoprecipitation assay and urea lysis buffers. Proteome Sci. October 2008, 6 (1): 30. PMC 2600628 . PMID 18950484. doi:10.1186/1477-5956-6-30.