吴定妃(16世纪?—1555年),名失考。中国古代明朝皇族女性,明世宗朱厚熜之妃。
吴氏入宫时间、年龄均无考。吴氏生前未封妃,嘉靖三十四年(1555年)闰十一月二十九日,未封妃吴氏薨,赐号为定,丧仪如平妃耿氏[1]。嘉靖三十五年(1556年)二月二十五日,授定妃吴氏父吴登为锦衣卫副千户[2]。