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用戶:Catfaster/沙盒

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圖像外觀

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相襯顯微鏡現實的圖片的特徵是灰色的背景上面可以顯示出明暗的樣品結構。明暗的邊緣表示了樣品光學密度的變化,例如細胞和水的邊界,這通常表現為在暗的物體周圍會有明亮的光暈。



自商品納豆中提取的納豆菌。左圖為TSA平板培養基上生長的菌落,右圖為經孔雀石綠-番紅染色的芽孢(綠色)和營養態(紅色)菌體

技術優缺點

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在倒置顯微鏡上進行活細胞觀察,使用ph2相襯光闌和x40相襯物鏡,直接透過塑料細胞培養瓶(T25瓶)成像,瓶中紅色液體為添加了酚紅和動物血清的MEM培養基,細胞貼附在底面內壁上生長,右圖為看到的情形(HeLa細胞)

相對於其它對比增強技術,如DIC,相襯顯微技術不使用偏振光照明,因而可以觀察雙折射介質,如透過塑料培養瓶或培養皿進行活細胞觀察,這在細胞學研究上特別有用。如和落射熒光(EPI)技術連用,相襯物鏡可以透過70%的激發光,優於其它反差增強技術(相位板產生部分衰減),所以相襯往往作為輔助成像功能出現在熒光顯微鏡上。此外,相襯套件的採購價位相對較低,使用調整也較為簡單。[1]

相襯顯微技術存在一些固有的不足。由於在聚光鏡中使用環形光闌,啟用相襯照明時聚光鏡的數值孔徑有所限制,所以軸向解像度較低。另外,標本和背景折射率差異較大的分界處會出現明顯的光暈,導致如細胞膜、細胞器外緣等位置的細節被遮蔽[1]

測試

一些型號的相襯顯微鏡的聚光鏡系統出廠前已經預先進行校準,[2]因而不需要由用戶進行對中操作[3]

  1. ^ 1.0 1.1 Molecular Expressions Microscopy Primer: Specialized Microscopy Techniques - DIC and Phase Contrast Comparison. micro.magnet.fsu.edu. [2018-07-04]. 
  2. ^ Details. www.leica-microsystems.com. [2018-07-04] (英語). 
  3. ^ Details. www.leica-microsystems.com. [2018-07-04] (英語).