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噬菌体展示技术

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噬菌体展示周期。 1) 病毒外壳蛋白+要被进化的基因(通常是抗体片段)的融合蛋白在噬菌体中表达。 2) the library of phage are washed over an immobilised target. 3) the remaining high-affinity binders are used to infect bacteria. 4) the genes encoding the high-affinity binders are isolated. 5) those genes may have random mutations introduced and used to perform another round of evolution. The selection and amplification steps can be performed multiple times at greater stringency to isolate higher-affinity binders.

噬菌体展示技术(英语:Phage display),将编码所需产物的外源 DNA 片段插入噬菌体基因组,并使之与噬菌体衣壳蛋白编码基因或其他结构基因相融合,然后用该重组噬菌体侵染宿主细菌复制形成大量带有杂合衣壳蛋白(或其他结构蛋白)的噬菌体颗粒,从而捕获 cDNA 表达文库中与“诱饵”相互作用的蛋白质[1]

噬菌体展示技术在病毒研究领域有广泛运用[2]

噬菌体展示技术中最常用的噬菌体是M13和 fd 丝状噬菌体[3][4], 尽管T4[5]、T7和λ噬菌体也被使用。

历史

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1985年,乔治·P·史密斯(George P. Smith)首次描述了噬菌体展示技术,当时他通过将病毒的衣壳蛋白与一系列肽序列中的一个融合,证明了肽在丝状噬菌体(感染细菌的细长病毒)上的展示[6]

参看

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竞争技术:

参考资料

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  1. ^ Zhu, Yuxian.; Li, Yi.; Zheng, Xiaofeng.; 朱玉贤.; 李毅.; 郑晓峰. Xian dai fen zi sheng wu xue. 现代分子生物学 Di 3 ban. Beijing: Gao deng jiao yu chu ban she. 2007. ISBN 978-7-04-022214-2. OCLC 1159520737. 
  2. ^ 张忠东; 成军; 钟彦伟; 王业东; 董菁; 陈天艳; 杨倩; 张树林; 刘妍. 应用噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒核心启动子结合蛋白. 解放军医学杂志. 2004, 29 (1): 16–19 [2020-07-14]. (原始内容存档于2020-07-14). 
  3. ^ Smith GP, Petrenko VA. Phage Display. Chem. Rev. April 1997, 97 (2): 391–410. PMID 11848876. doi:10.1021/cr960065d. 
  4. ^ Kehoe JW, Kay BK. Filamentous phage display in the new millennium. Chem. Rev. November 2005, 105 (11): 4056–72. PMID 16277371. doi:10.1021/cr000261r. 
  5. ^ Malys N, Chang DY, Baumann RG, Xie D, Black LW. A bipartite bacteriophage T4 SOC and HOC randomized peptide display library: detection and analysis of phage T4 terminase (gp17) and late sigma factor (gp55) interaction. J Mol Biol. 2002, 319 (2): 289–304. PMID 12051907. doi:10.1016/S0022-2836(02)00298-X. 
  6. ^ Smith GP. Filamentous fusion phage: novel expression vectors that display cloned antigens on the virion surface. Science. June 1985, 228 (4705): 1315–7. Bibcode:1985Sci...228.1315S. PMID 4001944. doi:10.1126/science.4001944.