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酵母菌双杂合系统

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酵母菌双杂合系统,英文为Yeast two-hybrid system,亦简称Two-hybrid screening,是一种研究蛋白质交互作用 [1]或蛋白质和DNA交互作用[2][3]的实验技术。

此系统的基本原理是报导基因上游的启动区域与转录因子结合后,使下游的报导基因表现。在酵母菌双杂合系统中将转录因子设计为结合区(Binding domain, BD)和活化区(Active domain, AD),结合区可与基因上游的启动区域结合,活化区负责活动下游报导基因开始转录[1][2]

历史

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1989年Fields and Song率先开发出这项技术来研究蛋白质间的交互作用,他们最早使用的是Saccharomyces cerevisiae这种酵母菌的GAL4表达系统,这种利用半乳糖影响基因表现原理[4],来进行研究蛋白质和DNA交互作用、DNA间交互作用的筛选技术,在大肠杆菌中有更多的应用。[3]

功用

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  1. 探讨蛋白质对应的生理功能[5]
  2. 了解作用需启用的蛋白质
  3. 过滤没有作用的蛋白质
  4. 建立起蛋白质数据库

相关条目

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参考资料

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  1. ^ 1.0 1.1 Young K. Yeast two-hybrid: so many interactions, (in) so little time.. Biol Reprod. 1998, 58 (2): 302–11. PMID 9475380. doi:10.1095/biolreprod58.2.302. (原始内容存档于2007-09-27). 
  2. ^ 2.0 2.1 Joung J, Ramm E, Pabo C. A bacterial two-hybrid selection system for studying protein-DNA and protein-protein interactions. Proc Natl Acad Sci USA. 2000, 97 (13): 7382–7 [2009-03-06]. PMID 10852947. doi:10.1073/pnas.110149297. (原始内容存档于2008-05-02). 
  3. ^ 3.0 3.1 Hurt J, Thibodeau S, Hirsh A, Pabo C, Joung J. Highly specific zinc finger proteins obtained by directed domain shuffling and cell-based selection. Proc Natl Acad Sci USA. 2003, 100 (21): 12271–6 [2009-03-06]. PMID 14527993. doi:10.1073/pnas.2135381100. (原始内容存档于2008-06-25). 
  4. ^ Fields S, Song O. A novel genetic system to detect protein-protein interactions. Nature. 1989, 340 (6230): 245–6 [2009-03-06]. PMID 2547163. doi:10.1038/340245a0. (原始内容 (abstract)存档于2016-08-17).  Abstract is free; full-text article is not.
  5. ^ 功能性探讨蛋白质与蛋白质的交互作用 Functional Approaches to protein-protein interactions游佳融 1、李芳仁 1,21 台大医院医学研究部 2台大医学院分子医学研究所