Vero細胞：修订间差异
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2020年2月22日 (六) 03:44的版本
Vero細胞（亦稱非洲綠猴腎細胞）是一種非整倍性的非洲綠猴腎細胞系，最初由日本千葉大學的Yasumura和Kawakita於1962年3月27日，分離自正常非洲成年綠猴的腎臟上皮細胞[1]。其中「vero」即「verda reno」的縮寫，其中「verda reno」在世界語中有「綠色的腎臟」的意思，而「vero」則在世界語中表示「真相」[2] 。
特徵
Vero細胞是連續的非整倍性細胞系，這意味着它的染色體數目異常，而且已知連續的細胞系可以通過許多分裂週期，不會老化，Vero細胞的干擾素分泌出現缺陷。它們與正常的哺乳動物細胞不同，在被病毒感染時不會分泌干擾素α/β[3]。然而，它們仍然具有干擾素-α/β受體（IFNAR），因此當將重組干擾素添加到其培養基中時，它們仍然可以作出反應。
Sun等合成了五種不同尺寸的草酸鈣（COM）晶體，包括50 nm、200 nm、1 μm、3 μm、10 μm，並且比較這五種尺寸的草酸鈣晶體對Vero細胞的損傷差異[4][5]。實驗結果表明，COM的尺寸和聚集程度是影響晶體細胞毒性的重要原因，而細胞對晶體的內吞方式與晶體尺寸存在密切的關係[4]。Vero細胞內吞50nm和100 nm的COM晶體主要以網格蛋白介導的途徑，內吞1 μm的COM晶體則主要以巨胞飲（macropinocytosis）的形式進行內吞作用，而Vero細胞難以內吞尺寸更大的微米晶體[6]。
2014年，有日本的研究人員確定Vero細胞的整個基因組序列[7]。Vero細胞的12號染色體具有純合的〜9-Mb缺失，導致基因組中I型干擾素基因簇和細胞週期蛋白依賴性激酶抑製劑CDKN2A和CDKN2B的丟失[7]。儘管非洲綠猴先前被歸類為草原猴（Cercopithecus aethiops），但是它們已經被歸類為綠猴屬（Chlorocebus）[8]。有基因組分析表明，Vero細胞源自雌性綠猴（Chlorocebus sabaeus）[7]。
細胞培養
Vero細胞在傳代培養時的生長狀況良好，並且發現細胞膜界線清晰和胞漿透明度較好的現象。Vero細胞的形態較為完整，細胞增殖的速度較快。Vero細胞傳代後的第三天開始形成單層，傳代細胞在第七天形成致密單層，此種致密單層在連續培養第十二天後逐漸老化，細胞在第十六天開始從培養瓶壁上脫落[9]。
Vero細胞在轉瓶後，可以在細胞培養二十四小時後出現貼壁，細胞在培養三天後可以達到相對靜止期，細胞培養的第五天可以長成單層，細胞培養到第十二天時發現其生長致密，而細胞培養至第十四天時則開始出現老化。轉瓶後的細胞生長速度比轉瓶前緩慢，然而單層細胞持續的時間比轉瓶前更持久。進行支原體檢查時未發現有支原體的生長及污染。細胞型分析結果表明Vero 細胞的核型沒有發現明顯的異常之處，而染色體數目也沒有明顯變化[9]。
研究用途
Vero細胞可以用於多種研究用途。Vero細胞可以篩選大腸埃希氏菌的毒素。在Vero細胞被建立後，這些毒素亦可以稱為「Vero毒素」。由於與痢疾志賀氏菌（Shigella dysenteriae）分離出的志賀氏毒素相似，因此後來被稱為志賀氏樣毒素（Shiga-like toxin）[7]。
Vero細胞又可以作為錐蟲目等真核寄生蟲的宿主細胞[7]。此外，Vero細胞被廣泛應用於病毒感染分子機制研究、疫苗及重組蛋白的生產[10][11][12]，世界衛生組織甚至認可其作為疫苗生產細胞系，建議將其作為流感疫苗生產的替代基質。目前已知Vero細胞可以協助生產狂犬病[13]及水貂犬瘟熱等疫苗[14]，而用Vero細胞培養的流感疫苗可以更好地介導人體產生對流感的免疫應答[15]。
豬流行性腹瀉病毒
Hofmann等通過在培養基中添加胰蛋白酶，證實豬流行性腹瀉病毒（PEDV）除了能夠在天然宿主的初始靶細胞上增殖外，還可以在Vero細胞中增殖。同時又發現胰蛋白酶對PEDV纖突糖蛋白的切割作用，增強病毒對Vero細胞的感染力[16]。Ye等通過構建穩定表達PEDV ORF3蛋白的Vero細胞，發現ORF3蛋白能夠促進PEDV的增殖[17]。然而有研究顯示不同的結果，例如Chen等發現orf3基因轉譯的提前終止，有利於PEDV適應Vero細胞，並且可以提高其在Vero細胞上的複製能力[18]；而Sun等對非胰蛋白酶依賴PEDV 85-7的Vero細胞的研究表明，PEDV的複製並沒有被orf3基因的突變或轉譯的提前終止顯著影響[19]。另外，Li等構建缺失orf3基因的重組PEDV，發現orf3基因缺失株和攜有全長orf3基因的重組病毒，在Vero細胞上的滴度相同，故而推測orf3基因不影響其在Vero細胞上的增殖[20]。
參考資料
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